傳說耶稣在最後的晚餐中使用的聖杯的水會使他永生。 在一次淘金活動中，發現了記錄聖杯的石碑。聖杯的存在可能會吸引大量瘋狂的人去尋找它。 印第安納·瓊斯博士(哈裏森·福特飾演)就是其中之一，甚至他的父親老瓊斯(肖恩·康納利飾演)也被卷入其中——但他給瓊斯留下了聖杯的紙條，然後就消失了。 [踏上威尼斯之地，瓊斯會見了他事先安排好的艾利森·杜迪博士(由艾利森·杜迪扮演)。當他們在圖書館裏通過線索找到聖盾後，他們開始被十字劍的兄弟們追捕。 經過一番曲折，瓊斯終于找到了老瓊斯。與此同時，斯奈德的納粹身份暴露了，他的筆記也被偷了。 聖杯隨時都可能落入納粹手中。 結果，瓊斯的父親和兒子開始一起表演一出精彩的戲劇來拯救聖杯！
